分享一些金线莲抗氧化活性的研究方法
发布时间:2024-07-21 11:38:16
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以下是一些常用于研究金线莲抗氧化活性的方法:
化学分析法:
总抗氧化能力测定:例如使用磷钼络合物法,测定金线莲提取物将 Mo(VI)还原为 Mo(V)的能力,从而反映总抗氧化能力。
总酚和总黄酮含量测定:通过福林 - 酚试剂法测定总酚含量,使用特定显色剂测定总黄酮含量,因为酚类和黄酮类物质通常具有抗氧化活性,其含量可在一定程度上反映抗氧化能力。
基于自由基清除的测定:
DPPH 自由基清除法:DPPH 是一种稳定的自由基,在溶液中呈紫色。金线莲提取物能清除 DPPH 自由基,使其溶液褪色,通过测定吸光度的变化来计算自由基清除率。
ABTS 自由基清除法:ABTS 经氧化后形成 ABTS+自由基,呈蓝色。测定金线莲提取物对 ABTS+自由基的清除作用,通过吸光度变化计算清除率。
超氧阴离子自由基清除法:利用黄嘌呤 - 黄嘌呤氧化酶反应体系产生超氧阴离子自由基,与特定试剂反应后显色,观察金线莲提取物对其的清除效果。
细胞模型测定:
细胞内活性氧(ROS)检测:使用荧光探针(如 DCFH-DA)标记细胞内的 ROS,在金线莲提取物处理后,通过流式细胞仪或荧光显微镜检测荧光强度的变化,反映细胞内 ROS 水平的降低,从而体现抗氧化活性。
细胞抗氧化酶活性测定:检测金线莲提取物处理后的细胞中抗氧化酶(如超氧化物歧化酶 SOD、谷胱甘肽过氧化物酶 GSH-Px 等)的活性变化,以评估其对细胞抗氧化防御系统的影响。
动物实验:
在动物体内建立氧化应激模型(如给予特定氧化剂或诱导疾病模型),然后给予金线莲提取物,检测动物组织或血液中的氧化应激指标(如丙二醛 MDA 含量、抗氧化酶活性等),评估其体内抗氧化活性。
脂质过氧化抑制测定:
诱导脂质体或细胞膜的脂质过氧化反应,测定金线莲提取物对脂质过氧化产物(如丙二醛 MDA)生成的抑制作用。
这些方法可以从不同角度评估金线莲的抗氧化活性,为深入研究其抗氧化机制和应用提供依据。